導讀
過濾操作后，處理得當的過濾器是允許重復使用的，企業需按照制藥機械供應商的指導建議進行及時清洗與滅菌。例如，某品牌0.2μmPTFE過濾器在30min，145°C條件下，可耐受150次(100次正向、50次反向)蒸汽滅菌。
相關規定
中國GMP2010版附錄3生物制品第二十五條規定：“管道系統、閥門和呼吸過濾器應便于清潔和滅菌，應盡量采用在線清潔、在線滅菌系統，密閉容器(如發酵罐)的閥門應能用蒸汽滅菌。呼吸過濾器應為疏水性材質，且使用效期應經驗證。”FDA在《無菌藥品生產工藝指南》中規定：“每批使用之后，除菌過濾器通常應當被丟棄，但是，如果圖2_80在線完整性檢測儀 可以證明重復使用是有理由的，那么需要進行可以體現最多處理批次的驗證”。歐盟GMP附錄1無菌藥品的生產規定：“同一個過濾器不應當使用超過一個工作日，除非經過驗證。”
清洗方式
過濾結束后，濾芯和套筒均需得到及時清洗，且清洗后需要驗證。套筒可隨配液系統一起進行在線清洗，也可以離線手工清洗。濾芯的清洗壓力要嚴格按照產品說明書給定的參數來執行，可采用正向清洗或反向清洗的方式進行。正向清洗時清洗劑或清洗水從膜的上游到下游進行清洗，建議清洗壓力可稍大于生產壓力;反向清洗時，清洗劑或清洗水從膜的下游到上游進行清洗。選擇清洗劑時，需考慮堵塞的類型、膜的類型和應用的要求。例如，濾芯內的軟性顆粒污垢可采用堿液進行處理并去除。需要注意的是，PVDF不能接觸堿液，否則，濾膜會從極性轉換成非極性且不可逆轉，但是PVDF蛋白質吸附極低，在生物制藥行業應用廣泛，可采用40?50°C的250?300mg/L NaClO溶液進行清洗處理。
滅菌方法
除菌級過濾器的滅菌方法主要有輻射滅菌、氣體滅菌和濕熱滅菌三種。濕熱滅菌又可分為高壓滅菌和在線蒸汽滅菌兩種方式。很多除菌級過濾器都可以進行多次高壓滅菌和在線蒸汽滅菌。過濾器的再滅菌應當參照生產商提供的過濾器使用說明，再滅菌和/或多次滅菌的條件、滅菌周期數量和累積的滅菌時間以及對過濾器的影響，需要進行驗證。
- 輻射滅菌。輻射滅菌所使用的射線為伽瑪射線，只有耐受輻射滅菌的過濾器才能使用此方法，其優勢在于有較高的滅菌水平、無氣體殘留且過濾器可保持干燥。對于一次性系統，最好使用在線輻射滅菌，不推薦對過濾器進行多次輻射滅菌，但是由于設備成本等原因，輻射滅菌在制藥企業應用較少。
- 氣體滅菌。氣體滅菌一般是指環氧乙烷滅菌，由于考慮到由此產生的氯乙醇、乙二醇及環氧乙烷殘留，該方法在過濾器的滅菌中較少應用。
- 高壓滅菌。高壓滅菌所使用的滅菌設備為濕熱滅菌柜，通常的設定溫度在121?135°C，不同過濾器的有效滅菌時間都應被驗證。例如，某品牌的0.22^mPVDF除菌過濾器在135°C、30min條件下，能夠高壓滅菌30次;在高壓126°C，60min條件下，能耐受30次循環滅菌。
滅菌過程中必須有包裹物作為屏障保護，以防止滅菌后過濾器下游發生二次污染。高壓滅菌的預真空度應根據過濾器體積大小進行適當調整，以保證空氣的排出和蒸汽穿透，包裹物需保證過濾器滅菌時內外空氣和滅菌用蒸汽的對流通暢(圖2.81)。為避免冷凝水積聚于濾芯內部，滅菌過程中濾器應豎直放置，開啟上、下排氣口。
圖2.81高壓滅菌前的濾芯準備
④在線蒸汽滅菌。在線蒸汽滅菌(SIP)是制藥行業應用最廣泛的除菌級過濾器滅菌方法，其具有滅菌時間短、滅菌后環境不會被破壞等優勢，已成為制藥企業的首選滅菌方法。濾膜的最高工作溫度一般不超過140°C,在線蒸汽滅菌是將過濾器安置在金屬套筒內直接向管路中通2?3bar壓力的飽和純蒸汽，滅菌溫度為121?135°C(圖2.82)。SIP過程中的上下游閥門順序、冷凝水和空氣去除都應被驗證，且需要時時檢査過濾器兩端壓差及冷點溫度以保證滅菌有效性。
圖2.82藥液過濾器SIP原理
在線蒸汽滅菌只適用于可進行在線滅菌的過濾器，以聚丙烯或聚碳酸酯等材質作為外殼的囊式過濾器不能釆用在線蒸汽滅菌。在進行在線蒸汽滅菌前應咨詢過濾器生產商關于過濾器的最高耐受滅菌溫度、時間、壓差及次數。
例如，某品牌除菌級PVDF過濾器的最大正向滅菌壓差為0.35bar(135°C),最大反向滅菌壓差僅為0.1lbar(135°C)。純蒸汽的進氣壓力一般在2bar以上，在實際操作過程中，可在過濾器的上、下游安裝壓力表或壓力傳感器監測過濾器濾膜的壓差。統計表明，在線蒸汽滅菌時，操作不當而導致的壓差過大是濾膜完整性發生破損的主要原因之一。
疏水器的必要性
為防止滅菌過程中親水性過濾膜表面被冷凝水覆蓋而形成蒸汽通路阻斷，采用疏水器進行適時疏水是非常必要的。由于濾膜的正向耐壓能力遠遠優于反向耐壓能力，除菌級過濾器宜采用正向SIP;呼吸器安裝在罐頂，在設計合理的情況下，也可選擇反向SIP。SIP結束后的閥門關閉順序需要被驗證。為防止管路內部形成負壓，需考慮適當地引入空氣來維持系統的氣壓平衡。已滅菌的除菌級過濾器下游引入的氣體必須為無菌氣體，可以考慮液體過濾器正向引入空氣或者下游加裝除菌級氣體過濾器引入空氣。
為保證滅菌后的無菌狀態，除菌級過濾器SIP后的完整性測試必須采用在線測試方式進行。在完整性檢測時，下游排水與排氣的過程同樣需要保證無菌性。可采用的方法有下游安裝帶空氣過濾器的潤濕液儲罐或者安裝一個同時進行除菌級氣體液體排放的過濾器。
